DB21T 1687-2008 生鲜肉中三聚氰胺的测定

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DB21T 1687-2008 生鲜肉中三聚氰胺的测定1.1.1 明书）。
1.1.2异辛烷（C8H18）
1.1.3三氯甲烷（CHCl3）
1.1.4异辛烷三氯甲烷混合液：准确量取40ml异辛烷（4.2.3）和60ml三氯甲烷(4.2.4)，混匀即得。
1.1.510%甲醇/20mMPBS：称取0.62gNaH2PO4•H2O，5.73gNa2HPO4•12H2O和9gNaCl用蒸馏水溶解，并定容至1000mL，取此溶液900mL，加入100mL甲醇混匀即得。
1.2仪器和设备
1.2.1酶标仪（带450nm滤光片）。
1.2.2涡旋混合器。
1.2.3冷冻离心机。
1.2.4微量加样器：20μL、50μL、100μL、150μL、250μL。
1.2.5恒温干燥箱。
1.2.6分析天平：感量0.01g。
1.2.7振荡器
4.3.8 绞肉机
4.3.9 匀浆机
1.3测定步骤
1.3.1样品处理
准确称量2g试料（3.1）精确到0.01g，加入10mL 10%甲醇/20mMPBS（4.2.6），涡旋30s，振荡5min，4000r/min离心5min，取2mL上清液加入2mL异辛烷三氯甲烷混合液（4.2.5），混匀，4000r/min离心5min，静置，取上层150μL待测。
1.3.2测试程序
取出欲测数量的微孔条安插在酶标板上，分别吸取0μg/L、20μg/L、100μg/L、250μg/L、500μg/L标准溶液（4.2.2）和试样萃取液（4.4.1）各150μL至包被有三聚氰胺抗体的对应微孔中，分别加入50μL三聚氰胺酶标记物溶液，振荡使混匀，25℃左右孵育30min。倾尽酶标板，清洗液（4.2.2）洗板4次，拍干。加100μL底物（4.2.2）至每个微孔中，振荡使混匀，25℃左右孵育30min。加100μL终止液（4.2.2）至每个微孔中，振荡混匀，450nm下读取各微孔吸光度值。
注：不同品牌的试剂盒其操作步骤可能略有差异，比如稀释倍数，具体操作步骤可根据试剂盒使用说明书略作调整。
试剂盒使用前恢复到室温。
标准和样品做平行试验以增加准确性。

1.4结果计算
以空白溶液（浓度为0的标准溶液）的吸光度值为100%作为计算基准，折算出各标准溶液和试样萃取液的相对吸光度值。