环境生物学实验指导-11环科

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环境生物学实验指导-11环科
环境生物学是环境科学专业开设的-门重要的专业必修课。通过本课程的学习，了解生物与环境之间的相互作用及其关系，生物在环境监测、环境评价、环境修复中的作用以及环境污染物的生物降解与转化规律，生物技术在环境治理中的应用等有关基本知识。 系统地掌握环境生物学的基本理论、基本知识和基本技能。
二、课程实验目的和要求：
1 、目的：通过实践操作，印证和巩固课堂教学中学到的环境生物学的理论知识，学会实地观察的技术，培养进行科学工作的能力，养成实事求是的工作作风和解决实际问题的能力。
2 、要求： 要求学生能够正确使用实验室的基本仪器设备，掌握环境生物学实验的基本操作技术，并能够客观地对实验进行观察、描述、比较、分析和综合。
三、考试（考核）方式 ：
以考核方式进行，要求学生独立完成每个实验并提交报告，并用百分制记分，然后求平均分 总分 / 实验次数。其实验成绩占课程总评成绩的 30% 。实验内容在课程考试中占 30% 。
四：主要仪器：
光学显微镜（含有关配件）50 台，超净工作台4台，高压蒸气灭菌锅2只，烘箱、恒温培养箱各3台，电炉 10 只，酒精灯、载玻片、接种环（针）、培养皿、试管、移液管、锥形瓶 等若干 。
五、主要参考书目：
[1] 孔繁翔，环境生物学，南京：南京大学出版社。
[2] 王家玲，环境微生物学实验，北京：高等教育出版社。
[3] 程树培，环境生物技术实验指南，南京：南京大学出版社。

实验- 有毒物质对水生生物的影响或急性毒性实验（4学时）
农药是-类特殊化学品。农药引起的环境污染和对生物的影响日益突出。在施用过程中，仅有1 %左右的农药作用于靶生物，其余的或残留于土壤，或通过间接途径进入水环境，从而影响土壤生物和水生生物。水环境中的农药可通过食物链途径逐级浓缩，从而导致对水生态系统的危害，甚至可最终危害人类降。农药对水生生物的毒性是农药的生态风险评价和管理的重要参数。

-、实验目的和内容
百草枯、草甘膦、敌杀死和乐果是目前我国广泛施用的除草剂和高效杀虫剂。本实验采用急性毒性实验来研究农药对水生生物的影响。

二、实验材料
实验动物：体长约58cm的鲫鱼；
实验药品：草甘膦
实验仪器：塑料桶（容量约﹥10L）；容量瓶（100ml）；移液管；烧杯（250ml）；

三、实验方法步骤
(-)急性毒性试验的-般程序
1.急性试验剂量分组
(1)先查阅文献，找出与受试化学物结构与理化性质近似的化合物的毒性资料，并以其相同生物种类和相同染毒途径得出LD50(LC50)值作为受试物的预期毒性中值。
(2)以此LD50(LC50)为待测化合物的中间剂量组，再上下以3倍之差的剂量各推1～2个剂量组做预试验，求出生物全活、全死剂量。
(3)在预试验的全活全死剂量之间设5～6个剂量组，-般的各组间距按1.2～1.5等比级数设计。
2.选用适宜的染毒方式染毒，观察两周内的死亡情况。
3.症状观察：LD50值并不能充分说明受试化合物的急性毒性，因此应详细观察实验动物接触不同剂量外源化合物后的中毒症状、发生和发展过程及规律，死亡前症状特点、死亡时间等。-般常见的中毒症状有兴奋现象、抑制现象。
4.剖检死亡和濒死动物及部分存活动物，做大体病理解剖检查。
5.计算LD50(LC50)，及其标准法。通常采用寇氏法和几率单位法。
6.根据所得结果，按相关急性毒性分级标准，评定其毒性大小，如急性毒性作用带愈小，则引起死亡的危险性就愈大，反之，则愈小；LD50值愈小，毒性愈大。

(二)本实验方法步骤
1、农药的配制：母液稀释法（二次稀释法）
即先用少量的水把农药稀释，配成母液，再用大量的水把母液稀释成所需浓度。这样配出的药液高效又稳定！
2、剂量分组
按水生生物急性毒性试验标准方法进行。每种农药设6～7 个试验浓度组，并同时设-对照组。每组5-6条鱼。
3、实验条件
实验用鱼体长约5-8cm，选择行动活泼、体色光泽完整的降鱼；实验容器采用塑料桶，盛水量以每尾鱼1-2L水为宜，水的pH值为6.7-8.5，水温为室温；水中的溶解氧不应低于4mg/L，用放置3天以上的自来水；试验期间的光暗比为12∶12，温度23 ±1 ℃。
4、LD50计算方法：直线内插法
四、实验报告
1、实验目的
2、实验方法步骤
3、实验结果（观察结果并计算LD50）并分析试验结果